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世界上最小的生物反應(yīng)器在美問世 (2005-05-18)

發(fā)布時間:2007-12-04 作者: 來源:儀器信息網(wǎng) 瀏覽:952
利用在小水滴中包裹多個單細胞或單細胞器的方法,可以將光學誘捕法和微流控小滴生成技術(shù)結(jié)合在一起。   目前,傳統(tǒng)的試管檢測技術(shù)正逐步被淘汰。由于微流控技術(shù)使得在日益小型化的容積內(nèi)研究生化反應(yīng)過程變得可能,實驗室級的研究正向納米級方向深入發(fā)展。美國華盛頓大學的Daniel Chiu及其同事,在最近發(fā)明了一種新方法,即僅用10-12升到10-15升的小水滴就可以包裹住多個單細胞或單細胞器。   在近期《分析化學》雜志上的一篇文章中,Chiu及其同事提出了兩種新方法,這兩種方法可以將微流控小滴生成技術(shù)和光學誘捕法結(jié)合在一起,以便有選擇性地、穩(wěn)定地包裹某個單細胞或細胞器。一種方法是利用T型槽,在T型槽內(nèi)水相可以被垂直地導入到流動的油相內(nèi)。當對水相施加壓力時,流動的油可以連續(xù)切斷小水滴。另一種方法是利用壓縮槽,在壓縮槽內(nèi)水相被擠壓通過狹窄的管道,并流入到一個大的油池中。被堵住的水在管道內(nèi)形成小水滴,然后進入油池中。在這兩種方法中,利用光學鑷子將細胞或細胞器放在油水界面上,這樣微粒就被包裹在正在形成的小滴中。Chiu認為,與以前的微流控技術(shù)設(shè)計相比,這兩種方法有了明顯改進,“利用光學方法移動細胞具有極好的可控制性和靈活性”。   具有較高表面電荷的微粒(如細胞或細胞器)一旦在小水滴中被捕獲,它們就不能穿過水油界面恢復到原來的狀態(tài),并被穩(wěn)定地限制。Chiu的研究小組現(xiàn)已成功對單個B淋巴細胞和單個線粒體進行了包裹,這表明利用該方法研究單細胞和單細胞器頗具潛力。Chiu解釋說,“研究單細胞很有意義,因為每個細胞都是不同的”,“這種方法不僅僅用于研究普通細胞,也可以用于研究稀有細胞。”   由于微粒被固定在比其自身體積還小的小滴中,因而細胞內(nèi)含物在溶解前和溶解后的濃度保持不變,這一點對于利用單細胞進行生化分析非常關(guān)鍵。為了說明利用該方法進行此類研究的作用,研究者進行了酶活性分析實驗。一個包含熒光素β-D-2-吡喃半乳糖(FDG,是細胞內(nèi)β-半乳糖苷酶的熒光底物)的小水滴捕獲了一個堅果細胞,隨著光解和β-半乳糖苷酶的釋放,小水滴中的反應(yīng)產(chǎn)物?熒光素不斷積累,這使小水滴中熒光素含量非常高。如果沒有微小水滴容積的限制,稀釋作用會使熒光素難以被示蹤顯示。Chiu說,“你可以用分辨率很高的顯微鏡來觀察細胞和亞細胞的結(jié)構(gòu),但你無法通過顯微鏡獲得更多的生化信息。”“我們正努力開發(fā)一個平臺,使我們能夠在非常小的尺度上做些改變,并能在細胞或細胞器水平上獲取一些信息,而通常這些信息只有通過大量的生化分析才能得到。”
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